豬基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒

豬基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒樣本實驗準備

在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行

檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃備用，有條件的，-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

    液體類標本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

1. 血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

2. 血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

3. 尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

5. 培養細胞

    檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

6. 組織標本

    切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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實驗過程中常見問題解答：

問：實驗過程中需要用到哪些實驗室器材？

答：1. 標準規格酶標儀;

2. 高速離心機;

3. 電熱恒溫培養箱;

4. 干凈的試管和Eppendof管;

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器;

6. 蒸餾水，容量瓶等。

問：客戶用48T試劑盒，大概只有十個樣所以他一次用不完那么多板條，但是他想做兩次，可封板膜只有一張，那如果用完了怎么辦？可以用什么別的東西取代嗎？

答：可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。